大型样品成像

大型样品成像


在胚胎学或发育生物学领域,希望显微镜有大的视野以便对整个样品进行处理和成像,如 线虫或大小约达 1 mm 的斑马鱼胚胎;在神经生物学领域,希望在脑切片中长距离跟踪神经元,这需要对大而厚的样品进行三维成像。拼图等创新成像方法支持这类应用。然而,这对显微镜用户而言仍是一件非常耗时的工作。通过总览图像获取样品的相关信息,再通过对样品细节的成像获取高分辨率图像。


自动化工作流程


Axio Scan.Z1 可提供全自动化工作流程:创建玻片预览,组织检测、聚焦和扫描,所有这些步骤完全在无人值守的情况下进行,可以处理多达100张玻片。可以选择明场和多通道荧光成像模式、也可以选择1”x3” 和 2”x3” 尺寸的玻片,还可以选择单层成像或 Z 轴序列成像。Axio Scan.Z1 的 ZEN 软件可以在扫描的同时利用算法对Z 轴序列图像进行景深扩展(EDF)处理。其优势在于:即便是厚样品也能获得清晰的单层图像。之后,您可与同事们一起利用内置成像服务器 ZEN browser 的强大用户管理、导航和注解功能从任意地方访问图像数据。


拼图


为获得大型样品的高分辨率图像,需要将感兴趣区域划分为多个更小的成像区域,这称之为拼片。单独对这些拼片成像,然后再通过拼接功能将它们组合成大幅总览图像。拼片可应用于所有显微技术,在大视场下具有更高的灵活性和分辨率。然而,手动操作、多视野图像采集和随后的对齐拼接仍是一个耗时的过程。借助高精度电动载物台和 ZEN高级成像软件,自动采集图像、自动对齐拼片,可在 Axio Imager、 Axio Observer 或 Axio Scan.Z1 显微镜系统中实现。拼图可与 z 轴序列和/或时间序列图像获取模块组合应用。ZEN 软件可以在获取图像的同时精确地将获取的图像拼接,轻松获得整个生物体的高分辨率图像,并通过互动式缩放界面快速显示整个图像。蔡司扫描电子显微镜 MERLIN 或 SIGMA VP 具有卓越的图像解析能力,可进行超大面积视野成像。直接使用ATLAS 软件,可以减少拼片数量、载物台移动延迟、及图像的重叠和计算复杂度。


总览图至高分辨率图像的缩放


由于具有大视野观察的物镜和较长的工作距离,体视显微镜和变倍显微镜成为大型生物样品成像的理想之选。在不更换物镜的前提下,快速简单地连续变倍实现从总览到细节的观察。SteREO Discovery.V12 和 SteREO Discovery.V20 都可以实现电动连续变倍,在观察具有出色三维效果的大型样品时可选择最佳放大倍率。变倍显微镜Axio Zoom.V16 是对完整的生物样品进行荧光成像的理想工具。选配更高数值孔径的物镜可使荧光亮度提高 10 倍,同时分辨率比传统体视显微镜提高两倍。您也可以选用 ApoTome.2  来扩展 Axio Zoom.V16 的功能,并对大型样品进行光学切片。


激光片层扫描显微技术(Light Sheet Fluorescence Microscopy) - 大型活体样品成像解决方案


Lightsheet Z.1 是唯一一个可以从多视角对荧光标记的大型活体样品进行三维成像的系统。无需盖玻片的样品制备方法和特殊的样品容器的使用,让在大视野下任意旋转观察样品成为可能。可选的培养装置与低损伤的光源让模式生物或活体组织在长时间发育过程观察实验中仍能存活。离线工作站可轻松处理大量的数据。


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